細菌懸浮稀釋液培養基微觀分析顯微鏡
夾層法
①取經誘變處理洗滌過的細菌懸浮稀釋液0,1毫升(約含100個菌細胞)
加到預先制好的基本培養基平板上,再加熔化的瓊脂(2%)培養基,迅速
搖動,使細胞分散均勻
②置于適溫下培養到長出明顯的菌落(淡水細菌1-2天就長出菌落,海
洋細菌要3-5天或更長時間)
③用墨水在培養皿的底部作長出菌落的標位。
④加上熔化的,冷至45°C左右的完全培養基約20毫升,待冷凝后,放于
適溫下培養
⑤再經培養后新長出的菌落多數是營養缺陷型
⑥用接種針挑取新長出的菌落,分別點種于基本培養基上并作完全培
養基斜面接種。如果經適溫培養后在基本培養基上不生長的那些菌落,
則可初步定為營養缺陷型。其相應的斜面接種物可供進一步鑒定。
逐個檢出法將經濃縮的營養缺陷型菌液稀釋接種于完全培養基上,在
適溫下培養。待長出菌落,逐個挑取菌落,分別接種于基本培養基和完
全培養基上。凡是在基本培養基上不長而在完全培養基上長出的菌落
就可能是營養缺陷型,可供進一步鑒定
限制培養基法
此法也稱限量補給法。其方法如下
①在基本培養基中加入5%的營養培養基或加0,01%蛋白胨
②將經濃縮處理的菌懸液涂布接種于上述培養基中
⑧適溫下培養,菌落長得較快,較大的為野生型,長得較小、較慢的菌
落可能是營養缺陷型,留待進一步鑒定如果只需要某種缺陷型,可在基
本培養基中加入微量的單一的某種氨基酸或堿基等。其補充量的確定
可先用已有的缺陷型測定。
營養缺陷型的鑒定
其鑒定方法可分為以下兩步:第一步先在同一培養皿上測定許多缺陷
型對同一類型化合物的需要,具體方法如下:
①挑營養缺陷型的新鮮培養物點種在營養瓊脂平板上。
